本发明提供了一种重组基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了一种如SEQ ID No.1所示重组基因编码得到的重组蛋白。本发明还提供了一种如上所述的重组蛋白在检测牛副结核杆菌中的应用,主要是作为包被抗原使用。本发明还提供了一种检测牛副结核杆菌的试剂盒,包括:如上所述的重组蛋白、包被液、洗涤液、封闭液、稀释液、辣根过氧化物酶标记的兔抗牛IgG和底物显色液。本发明以SEQ ID No.1所示的重组基因编码获得的重组蛋白作为包被抗原,采用间接ELISA检测牛副结核杆菌,具有较好的特异性、敏感性及重复性,结果直观准确。