Disclosed is a method for obtaining multi-leaf alfalfa material by means of a MsPALM1 artificial site-directed mutant. The method comprises: selecting a target fragment from an exon region of a compound leaf developmental regulatory gene MsPALM1 of alfalfa and constructing a plant CRISPR/Cas9 targeting recombinant vector MsCRISPR/Cas9::PALM1 and introducing the same into alfalfa cells and reproducing into sprouts, cutting and repairing to cause a loss-of-function mutation in the MsPALM1 gene of alfalfa cells, and then screening the mutant plants by restriction endonuclease digestion and/or targeted deep sequencing of the target fragments of the reproduced strain genome to obtain lines carrying four allelic MsPALM1 genes with simultaneous loss of function mutation. After phenotypic identification, it was confirmed that the compound leaves of the reproduced plants changed from three leaflets to five leaflets. The method can quickly obtain a multi-leaf alfalfa material with a short breeding period and stable traits.L'invention concerne une méthode permettant d'obtenir un matériau de luzerne multi-feuilles au moyen d'un mutant dirigé sur un site artificiel MsPALM1. La méthode comprend les étapes consistant à : sélectionner un fragment cible d'une région d'exon d'un gène de régulation du développement de feuille composée MsPALM1 de luzerne et construire un vecteur recombinant ciblant CRISPR/Cas9 de plante MsCRISPR/Cas9::PALM1 et introduire celui-ci dans des cellules de luzerne et le reproduire dans des pousses, couper et réparer pour provoquer une mutation induisant une perte de fonction dans le gène MsPALM1 de cellules de luzerne, puis cribler les plantes mutantes par digestion par endonucléase de restriction et/ou séquençage en profondeur ciblé des fragments cibles du génome de souche reproduit pour obtenir des lignées portant quatre gènes MsPALM1 alléliques avec mutation simultanée de perte de fonction. Après identification phénotypique, il a été confirmé que les feui
