가톨릭대학교 산학협력단;THE CATHOLIC UNIVERSITY OF KOREA INDUSTRY-ACADEMIC COOPERATION FOUNDATION
发明人:
JUE, DAE MYUNG,주대명,JUE, DAE MYUNGKR
申请号：
KR1020140095927
公开号：
KR1020160013730A
申请日:
2014.07.28
申请国别(地区):
KR
年份:
2016
代理人:
摘要：
The present invention relates to a method for producing a TAT-A20 fusion protein comprising the following steps: culturing a transformant expressing a gene encoding the TAT-A20 fusion protein where a cell permeable TAT protein and a A20 protein are fused； recovering inclusion bodies by disrupting cells in a culture medium obtained from the previous step, and washing the inclusion bodies； fusing the inclusion bodies obtained from the previous step； and refolding the protein obtained from the previous step by dialyzing the same in a buffer solution containing arginine. The present invention also relates to the TAT-A20 fusion protein produced by the method, and a pharmaceutical composition for preventing or treating inflammatory diseases, containing the fusion protein as an active ingredient. According to the method for producing the TAT-A20 fusion protein in the present invention, the TAT-A20 fusion protein having an excellent inhibitory activity against a tumor necrosis factor (TNF) can be produced, and a biological preparation, which is capable of overcoming the limitations of conventional therapeutic agents for inflammatory diseases and rheumatoid diseases, working more stably on many patients, and having an excellent therapeutic effect, can be provided by using the pharmaceutical composition containing the TAT-A20 fusion protein.본 발명은 세포 투과성 TAT 단백질 및 A20 단백질이 융합된 TAT-A20 융합단백질 유전자를 발현하는 형질전환체를 배양하는 단계； 상기에서 수득된 배양액의 세포를 파쇄시켜 봉입체를 회수 및 세척하는 단계； 상기에서 수득된 봉입체를 용성화시키는 단계； 및 상기에서 수득된 단백질을 아르기닌이 포함된 완충액에 투석하여 재접힘시키는 단계를 포함하는 TAT-A20 융합단백질의 제조방법 및 이에 의하여 제조된 TAT-A20 융합단백질, 상기 융합단백질을 유효성분으로 포함하는 염증 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 TAT-A20 융합단백질 제조방법에 따라 종양괴사인자(TNF)에 대한 억제 활성이 우수한 TAT-A20 융합단백질을 제조할 수 있고, 이를 포함하는 약학 조성물을 통해 기존 염증성 질환 및 류마티스 치료제의 한계를 극복하고 다수 환자에게 더욱 안정적으로 작용하고 치료 효과도 우수한 생물학적 제제를 제공할 수 있다.
