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高效双启动子PLEGFP-N1-spMyoD1绿色荧光逆转录病毒载体构建及使用方法
专利权人:
徐日福;秦宁;王志贤;包艳波
发明人:
徐日福,秦宁,王志贤,包艳波
申请号:
CN201010506230.7
公开号:
CN101993895A
申请日:
2010.10.14
申请国别(地区):
中国
年份:
2011
代理人:
纪尚
摘要:
一种高效双启动子PLEGFP-N1-spMyoD1绿色荧光逆转录病毒载体构建,属于动物基因工程及动物分子育种工程技术领域,其特征是:人工合成一骨骼肌特异启动子序列、采用RT-PCR方法从猪的骨骼肌组织中扩增基因全长序列;设计融合引物、利用重叠PCR扩增方法获得启动子和融合基因序列,T/A克隆到pMD18-T载体中,构建PLEGFP-N1-spMyoD1双启动子高效表达载体,经限制性内切酶鉴定并测序;用脂质体法包装、扩增,对病毒滴度和感染效率进行监测。有益效果是:1.应用Primer Premier5.0,DNA Club和Oligo 6.0自行设计出引物。2.克服了过去的目的基因无法特异性组织表达的局限性。3.同时提高了对目的基因功能研究的针对性和准确度。4.具有检测快速、便捷,可靠性强的优点。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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