本发明属于生物医药领域,提供一种抗CD73抗体或其抗原结合片段的制备和使用,所述抗体包含H CDR1、H CDR2和H CDR3,以及L CDR1、L CDR2和L CDR3;H CDR1的序列如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:17所示,H CDR2的序列如SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:18所示,H CDR3的序列如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:11或SEQ ID NO:19所示,L CDR1的序列如SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:13或SEQ ID NO:21所示,L CDR2的序列如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:14或SEQ ID NO:22所示,L CDR3的序列如SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:15或SEQ ID NO:23所示。本发明的抗CD73抗体能够特异性结合CD73,抑制CD73的酶活性。