本发明公开了一种靶向GPC3的嵌合抗原受体单核/巨噬细胞及构建方法和应用,属于肿瘤治疗领域。所述嵌合抗原受体包括胞外域、跨膜域和胞内域,胞外域包含抗原结合域,抗原结合域为抗GPC3scFv分子,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。通过嵌合抗原受体的编码核酸,或包含嵌合抗原受体的编码核酸的重组载体转入细胞,构建重组细胞即抗GPC3型嵌合抗原受体单核/巨噬细胞。该重组细胞对GPC3靶蛋白具有良好的杀伤能力;可分泌GM‑CSF和IL15,逆转巨噬细胞TAM极性,促进T细胞及NK细胞活性,重塑肿瘤微环境,获得高效、持久的抗肿瘤效应。本发明为CAR‑M治疗实体瘤奠定科学基础,具有良好的临床应用前景。