The invention relates to biotechnology, in particular to methods of preparing biocatalysts for obtaining glucose-fructose syrups from renewable starch-containing natural sugar substitutes - glucose-fructose syrups. A biocatalyst is described containing microbial biomass with glucose isomerase activity, silicon dioxide and insoluble hydro compounds Co (II). The microbial biomass is used as a paste with humidity 75-80%, silicon dioxide is used as hydro gel with humidity 60-95%, hydro compounds CO (II) are used as wet sediment washed by water. For increasing biocatalyst stability a cross link of the microbial mass is performed by a bifunctional reagent, for example, by glutaric dialdehyde in a concentration not exceeding 100 mg of reagent per 1 g of dry cells. A method is also described for preparing the biocatalyst and a method for obtaining glucose-fructose syrups. The technical result - increase of stability and glucose isomerase activity of biocatalyst.Изобретение относится к биотехнологии, в частности к способам приготовления биокатализаторов для производства из возобновляемого крахмалсодержащего сырья натуральных сахарозаменителей - глюкозофруктозных сиропов. Приведено описание биокатализатора, который содержит микробную биомассу, обладающую глюкозоизомеразной активностью, диоксид кремния и нерастворимые гидроксосоединения Со(II). Микробную биомассу используют в виде пасты с влажностью 75-80%. Диоксид кремния используют в виде гидрогеля с влажностью 60-95%. Гидроксосоединения Со(II) используют в виде влажного, отмытого водой осадка. Для увеличения стабильности биокатализатора проводят поперечную сшивку микробной биомассы бифункциональным реагентом, например глутаровым диальдегидом в концентрации, не превышающей 100 мг реагента на 1 г сухих клеток. Приведено описание способа приготовления биокатализатора и способа получения глюкозофруктозных сиропов. Технический результат - увеличение стабильности и глюкозоизомеразной активности биокатализатора.