您的位置：
首页
>
农业专利
>
详情页
一种利用CRISPR-Cas9系统对间充质干细胞定点敲入外源基因的方法
- 专利权人:
- 北京兴元和济生命医学科技有限公司
- 发明人:
- 崔俊生,王本旭,刘树涛
- 申请号：
- CN201911233881.0
- 公开号：
- CN110951693A
- 申请日:
- 2019.05.12
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2020
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明涉及生物技术领域,具体地,涉及一种利用CRISPR‑Cas9系统对间充质干细胞定点敲入外源基因的方法。所述方法包括以下步骤:1)构建包含外源基因的载体质粒,并且针对人的AAVS1位点设计构建AAVS1sgRNA/Cas9质粒;2)将包含外源基因的载体质粒和AAVS1sgRNA/Cas9质粒混合,将混合物转染间充质干细胞,将外源基因定点敲入间充质干细胞基因的AAVS1位点。本发明根据人的IL1R1、IL1R2、IL1Ra、TNFR1、TNFR2基因,构建基于CRISPR‑Cas9系统的同源重组质粒,然后将携带CRISPR‑Cas9质粒,将含外源基因的质粒共转染受体细胞,从而获得能够分泌表达外源基因所对应蛋白的间充质干细胞。获得的间充质干细胞持续表达上述蛋白,抑制体内IL‑1β或TNF‑α与其受体结合,从而抑制体内炎症进行,缓解或治疗类风湿性关节炎或骨关节炎。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
