SHEN, Binzhang,APGAR, James,BOUGRI, Oleg,RAAB, R. Michael
申请号：
USUS2011/048847
公开号：
WO2012/027395A3
申请日:
2011.08.23
申请国别(地区):
WO
年份:
2013
代理人:
摘要：
In planta consolidated bioprocessing has the advantages of decreasing biomass pretreatment costs, utilizing excess plant protein production capacity for enzyme production, and decreasing mass transfer resistance of enzyme diffusion to its substrate. However, in planta expression of cell wall degrading (CWD) enzymes often leads to detrimental plant phenotypes that impact crop yield. To provide in planta CWD enzyme activity without any adverse phenotype, a thermostable xylanase, XynB (EC 3.2.1.8), was engineered with a thermoregulated intein, Tth-HB27 DnaE-1 (Tth intein), that controls its hydrolytic activity through conditional intein splicing. Maize plants expressing the heat inducible Tth intein-modified XynB developed normally, yet possessed enhanced post harvest glucose production from dried corn stover. Expression of CWD enzymes as dormant, intein-modified proteins that can be activated by heat treatment after harvest provides the basis for developing a novel cellulosic processing trait in plants.La biotransformation consolidée in planta présente plusieurs avantages, à savoir que cela permet de faire baisser les coûts de prétraitement de la biomasse, dutiliser la capacité excédentaire de production de protéines par les plantes en vue de la production denzymes et de réduire la résistance au transfert de masse associé à la diffusion des enzymes vers leur substrat. Toutefois, lexpression in planta denzymes de dégradation de la paroi cellulaire conduit souvent à des phénotypes végétaux défavorables en termes de rendement des cultures. Pour obtenir une activité enzymatique de dégradation de la paroi cellulaire in planta sans phénotype défavorable, une xylanase thermostable, XynB (EC3.2.1.8) a été créée par génie génétique en association avec une intéine thermorégulée, Tth-HB27 DnaE-1 (intéine Tth). La régulation de lactivité hydrolytique de lenzyme se fait par épissage conditionnel de lintéine. Des plants de maïs exprimant la XynB thermo-inductible modifiée par linté
