一种新的TGF-β信号通路在如皋黄鸡雄性生殖细胞分化过程中功能验证方法

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专利权人:

扬州大学

发明人:

张亚妮,左其生,李碧春,王颖洁,汤贝贝,李东,纪艳芹,连超,王飞,路镇宇

申请号：

CN201610252413.8

公开号：

CN105838667A

申请日:

2016.04.21

申请国别(地区):

中国

年份:

2016

代理人:

许必元

摘要：

本发明公开了一种新的TGF‑β信号通路在如皋黄鸡雄性生殖细胞分化过程中功能验证方法：首先基于RNA‑seq数据源进行关键信号通路富集并筛选；利用TGFβ受体抑制剂:LY2109762，BMP4受体抑制剂:LDN193189在体内和体外两个水平对TGF‑β信号通路进行抑制以验证该通路在鸡雄性生殖细胞分化过程中的具体功能；设计LY2109762+BMP4，LDN193189+BMP4以及Double+BMP4实验组进行实验，实验过程中每个1d，取样一次。检测Smad2，Smad5的表达变化以及生殖标记基因的表达变化，利用间接免疫荧光和FACS检测各分组中细胞诱导后interginα6⁺interginβ1⁺细胞数量；采用鸡胚注射方式将抑制剂注射鸡胚，设计实验组：Y2109762，LDN193189以及Double组，孵化过程中于4d和18d取样，检测Smad2，Smad5的表达变化以及生殖标记基因的表达变化，利用组织免疫化学和FACS检测各分组中18d后睾丸中interginα6⁺

来源网站：

中国工程科技知识中心

来源网址：

http://www.ckcest.cn/home/