The present invention provides an antibacterial composition against mycobacterium smegmatis, which contains: an oily raw material comprising lemon grass oil, propylene glycol monocaprylate, ethoxy diglycol and quercetin; and an aqueous raw material, which is PEG-60 hydrogenated castor oil. The antibacterial composition of the present invention can be effectively used as an antimicrobial treatment agent against the mycobacterium smegmatis excellent in the field of a male mycobacterium smegmatis antibacterial agent.본 발명은 레몬그라스 오일, 프로필렌 글리콜 모노카프릴레이트, 에톡시다이글리콜 및 퀘르세틴으로 이루어진 유성원료; 및 PEG-60 수소화된 카스터 오일인 수성원료를 포함하는미코박테리움 스메그마티스(Mycobacterium smegmatis)에 대한 항균 조성물을 제공한다.본 발명의 항균 조성물은 남성 미코박테리움 스메그마티스 항균제 분야에서 우수한 미코박테리움 스메그마티스 항균 치료제로 유용하게 사용될 수 있다.