本发明涉及动物病毒学、免疫学、表观遗传学和新型免疫增强剂开发领域,提供了一种抗J亚群禽白血病病毒增殖的内源性反转录病毒RNA及其制备方法和应用。该RNA来源于鸡1号染色体基因组中内源性反转录病毒ALVE1衍生的反义长链非编码RNA,采用RACE和PCR克隆技术鉴定后,将其命名为lnc‑ALVE1‑AS1,其cDNA具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。本发明通过构建lnc‑ALVE1‑AS1过表达载体质粒,体外实验显示lnc‑ALVE1‑AS1可激活细胞抗病毒干扰素应答反应并抑制J亚群禽白血病病毒增殖。本研究发明不仅提供了抵抗禽白血病病毒的新手段,也为禽白血病病毒的防控提供了新思路。