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重组EnbrelFab片段在昆虫细胞表达系统中的制备方法
- 专利权人:
- 上海美迪西生物医药股份有限公司
- 发明人:
- 王涛,汪俊,陈春麟,周南梅
- 申请号：
- CN201611045267.8
- 公开号：
- CN106749664A
- 申请日:
- 2016.11.24
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 郑优丽`熊子君
- 摘要：
- 本发明涉及重组Enbrel Fab片段在昆虫细胞表达系统中的制备方法，包括：（a）将N端分别带有信号肽的Fab片段的轻链与重链的氨基酸序列的基因克隆于带有双启动子的杆状病毒表达载体内构建重组表达载体；（b）将所得的重组表达载体转座至感受态细胞中，筛选重组菌斑，提取重组质粒，并将其转染至昆虫细胞中，得到重组杆状病毒后进一步扩增病毒，并使用病毒感染放大培养的昆虫细胞以表达Fab蛋白，离心收集含Fab蛋白的上清产物；（c）将所得昆虫细胞表达上清首先使用膜包进行超滤浓缩和置换缓冲溶液，然后色谱柱纯化，即可得到全人源单克隆抗体恩利的Fab片段。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
