PURPOSE: A culture medium composition for promoting mesenchymal stem cells is provided to enhance proliferation of the mesenchymal stem cells and to enable cell therapy. CONSTITUTION: A culture medium composition for mesenchymal stem cells contains 1-3 ng/ml of EGF, 1-3 ng/ml of FGF, and 0.1-0.3 mM of ascorbic acid-2-phosphate in MSCEM(MSC expansion media). The mesenchymal stem cells are derived from porcine stem cells. A method for isolating and culturing the mesenchymal stem cells from porcine umbilical cord-derived mononuclear cells comprises a step of culturing the mononuclear cells.본 발명은 연골세포, 골아세포, 지방세포, 신경세포 등 다방면의 세포로 분화가 가능한 제대 유래 중간엽 줄기세포의 배양 배지 조성물, 이를 이용한 중간엽 줄기세포의 분리 및 배양방법 및 세포 치료용 조성물에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명의 배지 조성물은 돼지 제대 유래 중간엽 줄기세포에 특이적이고, EGF, FGF 및 아스코르브산-2-인산염이 MSCEM (MSC expansion media)에 포함되어 있으며, 본 발명의 배지 조성물 및 이를 이용한 중간엽 줄기세포의 분리 및 배양방법은 돼지 제대 유래 중간엽 줄기세포의 성장률을 촉진시켜 생산효율을 높일 수 있다. 또한 본 발명의 방법에 의해 제대 유래 단핵세포로부터 얻어진 다분화능 중간엽 줄기세포는 세포 치료용 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.