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人碱性磷酸酶糖蛋白的癌细胞高效表达系统及其应用
- 专利权人:
- 山东省医药生物技术研究中心
- 发明人:
- 曹广祥,付加芳,马军霞,王志宇,宗工理,王世立
- 申请号：
- CN201710024278.6
- 公开号：
- CN106591255A
- 申请日:
- 2017.01.13
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 张勇
- 摘要：
- 本发明公开了一种人骨肉瘤细胞系MG‑63在外源表达人碱性磷酸酶糖蛋白中的应用，以及rhALP的外源表达方法，包括如下步骤：(1)构建含有rhALP的重组质粒；(2)将重组质粒整合至人骨肉瘤MG‑63细胞内，获得能够表达rhALP的人骨肉瘤MG‑63细胞；(3)培养上述能够表达rhALP的人骨肉瘤MG‑63细胞，提取目的蛋白。本发明利用癌细胞MG‑63快速增殖及糖基化修饰系统的特性，通过基因工程技术利用人源癌细胞表达重组人碱性磷酸酶rhALP。本发明构建rhALP的重组表达载体，筛选能高效表达rhALP的MG‑63细胞；纯化并检测重组rhALP的糖基化状态及其生物学活性。重组rhALP的表达量和活性得到了极大的提高。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
