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草鱼呼肠孤病毒S11基因真核表达重组质粒的制备方法及其作为核酸疫苗的应用
- 专利权人:
- 河南师范大学
- 发明人:
- 裴超,高岩,孔祥会,孙效迎,李莉,吕爱军
- 申请号:
- CN201711022072.6
- 公开号:
- CN107760716A
- 申请日:
- 2017.10.27
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 路宽
- 摘要:
- 本发明公开了一种草鱼呼肠孤病毒S11基因真核表达重组质粒的制备方法及其作为核酸疫苗的应用,属于基因工程及分子免疫学技术领域。本发明的技术方案要点为:提取病毒基因组RNA,逆转录为cDNA,扩增出相应DNA序列,将该DNA序列构建到pcDNA‑3.1(+)质粒并转化大肠杆菌DH5α,筛选出含重组质粒的阳性克隆菌并将阳性菌大量培养,提取菌体中含有的重组质粒S11‑pcDNA3.1。将该重组质粒作为核酸疫苗肌肉注射草鱼,该核酸疫苗进入肌肉细胞并在肌肉细胞中表达草鱼呼肠孤病毒的VP35蛋白,从而刺激鱼体免疫细胞增殖、上调抗病毒相关基因表达以及刺激鱼体产生抗病毒抗体,有效提高草鱼抗草鱼呼肠孤病毒感染的能力,进而用于预防水产养殖中因该病毒引起的草鱼出血病。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/