The present invention describes a process comprising a) subjecting a microorganism to autolysis under conditions at which a substantial part of the RNA remains in a form degradable into 5-ribonucleotides; b) subjecting the autolysate to solid/liquid separation and recovering the RNA-containing cell wall fraction; and c) converting the RNA in the recovered RNA-containing cell wall fraction into 5- ribonucleotides, whereby the solid/liquid separation in step b) is done at a pH of lower than 5.1. Said process is simple and allows for the production of a very pure composition of 5'-ribonucleotides. It also allows for the production of a very clear yeast extract.La présente invention concerne un procédé comprenant a) la soumission d'un micro-organisme à une autolyse dans des conditions dans lesquelles une partie substantielle de l'ARN reste sous une forme dégradable en 5'-ribonucléotides ; b) la soumission de l'autolysat à une séparation solide/liquide et la récupération de la fraction de paroi cellulaire contenant l'ARN ; et c) la conversion de l'ARN dans la fraction de paroi cellulaire contenant l'ARN récupérée en 5-ribonucléotides, de telle manière que la séparation solide/liquide dans l'étape b) soit effectuée à un pH inférieur à 5,1. Ledit procédé est simple et permet la production d'une composition très pure de 5'-ribonucleotides. Il permet également la production d'un extrait de levure très limpide.