本发明公开了靶向人蛋白二硫键异构酶基因的小干扰RNA,其核苷酸序列选自:SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3,根据人蛋白二硫键异构酶的蛋白编码基因序列为目的基因,选取3个21nt的靶序列,设计并合成包含各靶序列的互补DNA序列以及无义干扰DNA链,退火后插入pLVX‑shRNA1表达载体,构建3个针对PDI的干扰质粒;实验表明,本发明所构建的RNA干扰表达载体对二硫键异构酶蛋白表达具有极强的抑制作用,并能够对HCV的复制产生一定影响;本发明在研究和/或鉴定基因功能、制备以宿主基因为靶点的抗HCV等病毒感染的基因药物方面具有较大的应用价值与前景。