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一种通过表面展示实现人源精氨酸酶‑1固定化的方法
- 专利权人:
- 湖北大学
- 发明人:
- 马立新,张贞,王亚平,唐荣兴
- 申请号：
- CN201610097606.0
- 公开号：
- CN105713888B
- 申请日:
- 2016.02.22
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 丁齐旭
- 摘要：
- 本发明提出了一种通过表面展示实现人源精氨酸酶‑1固定化的方法。步骤为：设计在冰核形成蛋白剪切变体(InaK‑N)的氨基端加入信号肽和带电荷多肽，在羧基端融合人源精氨酸酶‑1，在羧基端设计HA标签；构建各种重组质粒分别转化大肠杆菌感受态细胞，获得不同基因工程菌株；将不同菌株摇瓶培养；检测人源精氨酸酶‑1展示效率和酶活；挑取酶活最高的菌株大量培养，高效转化L‑精氨酸，合成L‑鸟氨酸。本发明通过冰核形成蛋白剪切变体融合人源精氨酸酶‑1在大肠杆菌细胞表面有效展示，从而实现了人源精氨酸酶‑1固定化。与原始的冰核形成蛋白展示系统相比，明显提高人源精氨酸酶‑1展示效率和酶活，与几丁质固定化法相比，降低成本，缩短流程，简化纯化步骤。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
