COGAN, Noel,MASON, John,KUMAR, Sandeep,NOVAK, Stephen,FORSTER, John,HAYDEN, Matthew,SAWBRIDGE, Tim,SPANGENBERG, German,WEBB, Steven R.,GUPTA, Manju,AINLEY, W. Mike,HENRY, Matthew J.
申请号：
USUS2013/058584
公开号：
WO2014/039872A1
申请日:
2013.09.06
申请国别(地区):
US
年份:
2014
代理人:
摘要：
An Engineered Transgene Integration Platform (ETIP) is described that can be inserted randomly or at targeted locations in plant genomes to facilitate rapid selection and detection of a GOI that is perfectly targeted (both the 5' and 3' ends) at the ETIP genomic location. One element in the subject disclosure is the introduction of specific double stranded breaks within the ETIP. In some embodiments, an ETIP is described using zinc finger nuclease binding sites, but may utilize other targeting technologies such as meganucleases, CRISPRs, TALs, or leucine zippers. Also described are compositions of, and methods for producing, transgenic plants wherein the donor or payload DNA expresses one or more products of an exogenous nucleic acid sequence (e.g. protein or RNA) that has been stably-integrated into an ETIP in a plant cell. In embodiments, the ETIP facilitates testing of gene candidates and plant expression vectors from ideation through Development phases.L'invention concerne une plateforme d'intégration de transgène génétiquement modifié (ETIP) qui peut être insérée aléatoirement ou à des emplacements ciblés dans des génomes de plantes pour faciliter la sélection rapide et la détection rapide d'un GOI qui est parfaitement ciblé (à la fois les extrémités 5' et 3') à l'emplacement génomique de l'ETIP. Un élément de la présente invention est l'introduction de coupures spécifiques double brin à l'intérieur de l'ETIP. Dans certains modes de réalisation, une ETIP est décrite à l'aide de sites de liaison à une nucléase à doigt de zinc mais peut utiliser d'autres technologies de ciblage telles que des méganucléases, CRISPR, TAL, ou des fermetures éclair à leucine. L'invention concerne également des compositions et des procédés de production de plantes transgéniques, l'ADN de donneur ou de charge utile exprimant un ou plusieurs produits d'une séquence d'acide nucléique exogène (par ex une protéine ou un ARN) qui a été intégrée de façon stable à l'intérieur d'une ETIP dans
