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一种Viviparous 1基因及其启动子表达载体的构建方法和应用
- 专利权人:
- 华中农业大学
- 发明人:
- 黄涛,廖玉才,李和平,瞿波
- 申请号：
- CN201110267782.1
- 公开号：
- CN102321657B
- 申请日:
- 2011.09.09
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 王敏锋
- 摘要：
- 本发明公开了一种Viviparous 1基因及其启动子表达载体的构建方法和应用，其步骤：A、目的基因及其启动子的克隆：合成引物VpromoterF、VpromoterR以玉米851213-1×HE124B基因组DNA为模板，扩增出目的基因Vp1的启动子序列Vpromoter.剥离玉米胚，在含10μmABA MS培养基中，摇床培养，提取mRNA，反转录合成cDNA，引物VgCF和VgCR，扩增出Vp1基因的编码序列Vp1cds，PCR产物经酶切后连接到pBluescript SK+/-，测序；B、载体构建：以pBML-PMI载体为基础，Vpromoter和Vp1cds经酶切后，与pBML-PMI质粒连接，构建成pBML-PMI-Vp1表达载体。C、Viviparous 1基因及其启动子在小麦穗发芽抗性育种中的应用。利用农杆菌介导，转化小麦愈伤，获得转基因小麦。提高了ABA信号传递的敏感性，增强了小麦种子的休眠性，获得的转基因阳性材料穗发芽抗性显著提高。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
