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一种扩增鱼类基因组DNA的方法
- 专利权人:
- 云南农业大学;云南省渔业科学研究院
- 发明人:
- 武祥伟,冷云,李光华,于虹漫
- 申请号:
- CN201510536062.9
- 公开号:
- CN105132408A
- 申请日:
- 2015.08.28
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 李中强
- 摘要:
- 本发明涉及一种扩增鱼类基因组DNA的方法,属于分子生物学领域;所述的扩增鱼类基因组DNA的方法按照以下步骤进行:第一步、提取鱼类样品中的基因组DNA;第二步、使用限制性内切酶酶切鱼类的基因组DNA,限制性内切酶为:TaqⅠ;第三步、酶切DNA片段连接特定的寡核苷酸接头,并根据酶切位点序列与接头序列设计特定引物;酶切位点序列为:5′-AGCT-3′;寡核苷酸接头为:adaptor-F: 5′-GACGATGAGTCCTGAG-3′,adaptor-R: 5′-CGCTCAGGACTCAT-3′;第四步、采用PCR法扩增酶切片段,以此增加鱼类的基因组DNA的数量;所述的PCR引物为:primer: 5′-GATGAGTCCTGAGCGA-3′;本发明在扩增时使用高保真的Pfu DNA聚合酶,减小PCR过程中的扩增错误。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/