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一种扩增鱼类基因组DNA的方法
专利权人:
云南农业大学;云南省渔业科学研究院
发明人:
武祥伟,冷云,李光华,于虹漫
申请号:
CN201510536062.9
公开号:
CN105132408A
申请日:
2015.08.28
申请国别(地区):
中国
年份:
2015
代理人:
李中强
摘要:
本发明涉及一种扩增鱼类基因组DNA的方法,属于分子生物学领域;所述的扩增鱼类基因组DNA的方法按照以下步骤进行:第一步、提取鱼类样品中的基因组DNA;第二步、使用限制性内切酶酶切鱼类的基因组DNA,限制性内切酶为:TaqⅠ;第三步、酶切DNA片段连接特定的寡核苷酸接头,并根据酶切位点序列与接头序列设计特定引物;酶切位点序列为:5′-AGCT-3′;寡核苷酸接头为:adaptor-F: 5′-GACGATGAGTCCTGAG-3′,adaptor-R: 5′-CGCTCAGGACTCAT-3′;第四步、采用PCR法扩增酶切片段,以此增加鱼类的基因组DNA的数量;所述的PCR引物为:primer: 5′-GATGAGTCCTGAGCGA-3′;本发明在扩增时使用高保真的Pfu DNA聚合酶,减小PCR过程中的扩增错误。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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