The invention relates to methods of preparing and assessing purified preparations of an RNA comprising a modified nucleoside. Thus, in one embodiment, the invention is a purified preparation of messenger RNA comprising a 1-methylpseudouridine residue. In some embodiments, the messenger RNA also comprises a polyA tail. In some embodiments, the messenger RNA also comprises an m7GpppG cap. In some embodiments, the messenger RNA also comprises a cap-independent translational enhancer. In some embodiments, the messenger RNA comprises at least about 95% to about 99.9% of all the nucleic acid present in the purified preparation. In some embodiments, the purified preparation of messenger RNA is significantly less immunogenic than an unpurified preparation of messenger RNA with the same sequence.Cette invention concerne des procédés de préparation et d'évaluation de préparations purifiées d'un ARN comprenant un nucléoside modifié. Dans un mode de réalisation, l'invention concerne une préparation purifiée d'un ARN messager contenant un résidu 1-méthyl-pseudo-uridine. Dans certains modes de réalisation, l'ARN messager contient également un queue polyA, Dans certains modes de réalisation, l'ARN messager comprend en outre une coiffe m7GpppG. Dans certains modes de réalisation, l'ARN messager comprend en outre un activateur de translation indépendant de la coiffe. Dans certains modes de réalisation, l'ARN comprend d'au moins 95% environ à 99,9% environ de la totalité de l'acide nucléique présent dans la préparation purifiée. Dans certains modes de réalisation, la préparation d'ARN messager purifiée est sensiblement moins immunogène qu'une préparation d'ARN messager non purifiée présentant la même séquence.
