The present disclosure provides a process for production of glucose having purity greater than 98% from pretreated cellulosic biomass comprising 50-95% cellulose, using thermo-chemical and enzymatic treatments. The process of the disclosure involves mild acid and/or alkali treatment of the pretreated cellulosic biomass for production of treated cellulosic biomass residue comprising polysaccharides containing greater than 98% glucose. The treatment results in high purity cellulose that is highly amenable to enzymatic hydrolysis and yields glucose having purity greater than 98%. The process of the disclosure also involves membrane separation of enzymes and oligosaccharides for recycling and separation of glucose to avoid product feedback inhibition.La présente divulgation concerne un procédé de production dun glucose ayant une pureté supérieure à 98 % à partir dune biomasse cellulosique prétraitée comprenant de 50 à 95 % de cellulose faisant appel à des traitements thermo-chimiques et enzymatiques. Le procédé selon la divulgation implique un traitement à lacide doux et/ou un traitement alcalin de la biomasse cellulosique prétraitée pour la production dun résidu de biomasse cellulosique traitée comprenant des polysaccharides contenant plus de 98 % de glucose. Le traitement permet dobtenir une cellulose de pureté élevée qui se prête facilement à une hydrolyse enzymatique et permet dobtenir un glucose ayant une pureté supérieure à 98 %. Le procédé selon la divulgation implique également la séparation des enzymes et des oligosaccharides sur membrane à des fins de recyclage et la séparation du glucose pour éviter la rétro-inhibition du produit.