MAERTENS GEERT,LOUWAGIE JOOST,BOSMAN ALFONS,SABLON ERWIN,ZREIN MAAN
申请号：
CY081101157
公开号：
CY1108424T1
申请日:
2008.10.16
申请国别(地区):
CY
年份:
2014
代理人:
摘要：
Η παρούσα εφεύρεση αναφέρεται σε μία μέθοδο για τον καθαρισμό μίας κυστεΐνης που περιέχει ανασυνδυασμένα εκφρασμένη πρωτεΐνη που περιλαμβάνει τουλάχιστον 2, κατά προτίμηση 3 ή 4 και ακόμη προτιμότερα όλα τα ακόλουθα στάδια: (α) σουλφονίωση ενός λύματος από ανασυνδυασμένα κύτταρα ξενιστή ή λύση ανασυνδυασμένων κυττάρων ξενιστή υπό την παρουσία χλωριούχου γουανιδινίου ακολουθούμενη από μία επακόλουθη σουλφονίωση του κυτταρολύματος, (β) αγωγή μ' ένα απορρυπαντικό επαμφοτερίζοντος ιόντος, κατά προτίμηση μετά από την αφαίρεση των κυτταρικών θρυμμάτων, (γ) καθαρισμό της σουλφονιωμένης έκδοσης της ανασυνδυασμένης πρωτεΐνης ή καθαρισμό της σουλφονιωμένης έκδοσης της ανασυνδυασμένης πρωτεΐνης με ακόλουθη αφαίρεση του απορρυπαντικού επαμφοτερίζοντος ιόντος, όπου ο εν λόγω καθαρισμός είναι κατά προτίμηση χρωματογραφία, ακόμη προτιμότερα μία χρωματογραφία Ni-IMAC με την εν λόγω ανασυνδυασμένη πρωτεΐνη να είναι μία ανασυνδυασμένη πρωτεΐνη με ετικέτα His, (δ) αποσουλφονίωση της σουλφονιωμένης έκδοσης της ανασυνδυασμένης πρωτεΐνης, κατά προτίμηση με μία μοριακή περίσσεια DTT,(ε) αποθήκευση υπό την παρουσία μίας μοριακής περίσσειας DTT. Η παρούσα εφεύρεση αναφέρεται επίσης σε νέες αλληλουχίες HCV NS3 όπως απεικονίζονται στα Σχέδια 1-8.The present invention relates to a recombinant expression protein containing a cysteine, including at least 2.Preferably, even the best 3 or 4 of all the steps: (a) a first-order__lambda_from the host cell to the recombinant cell or recombinant solution In the presence of a96395 detergent After the removal of preferred ions, the cell theta, P, u, and u；(c) Purified recombinant protein______from the distribution or purification of recombinant protein_____below__ The cleaning method of the ion detergent is optimized.Even the best nickel-a chromatographic iMac with the recombinant protein is a tagged recombinant protein expression,
