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一株表达ASFV P30蛋白的重组GI型日本脑炎病毒及其构建方法与应用
- 专利权人:
- 扬州大学
- 发明人:
- 李晨曦,李燕华,陈萱
- 申请号：
- CN202211147357.3
- 公开号：
- CN115725622A
- 申请日:
- 2022.09.19
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2023
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明涉及一株表达ASFV P30蛋白的重组GI型日本脑炎病毒及其构建方法与应用，利用同源重组技术将ASFV P30蛋白基因克隆入上游设置T7启动子的GI型日本脑炎病毒基因组中的5′UTR与C基因之间；P30蛋白基因的上游携带有日本脑炎病毒C基因的前102个碱基序列，保证了重组病毒的稳定；P30蛋白基因的下游含有T2A序列，保证了ASFV P30蛋白能够被正确的剪切。获得重组病毒的基因组全长cDNA后，利用T7启动子进行体外转录，获得病毒RNA并转染BHK‑21细胞，待细胞出现典型的细胞病变时，收集细胞上清即可获得表达ASFV P30蛋白的重组GI型日本脑炎病毒。该重组病毒具有遗传稳定型，能够稳定、高效的表达ASFV P30蛋白。本发明可快速获得含有ASFV和GI型JEV免疫原的重组病毒，为开发多效价疫苗奠定基础。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
