本发明公开了一种抗番茄黄化曲叶病毒的多基因嵌合体AVCTC及其制备方法和应用。所述多基因嵌合体AVCTC的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;所述多基因嵌合体AVCTC为番茄TMV病毒复制酶基因片段ORF400-700、番茄CMV病毒复制酶基因片段ORF45-345、番茄TYLCV病毒复制酶基因片段ORF420-720、烟草TMV病毒复制酶基因ORF2964-3264和黄瓜CMV复制酶基因ORF2057-2357的嵌合基因,是利用基因合成方法制备而成。将该多基因嵌合体AVCTC转化番茄,进而提高了转基因番茄的抵抗番茄黄化曲叶病毒的能力,为植物抵抗病毒提供有益的帮助。