本发明公开了一种指导β-受体阻断药用药的引物组合物、多重基因检测试剂盒及其使用方法。本发明试剂盒包括超纯水,X溶液,10×PCR缓冲液,PCR引物,25mM氯化镁溶液,DNA聚合酶和阳性对照品,特点是PCR引物包括以下3个与β-受体阻断药用药相关基因上的3个SNP位点上的不同基因型的正反向扩增引物及反应内参的正反向扩增引物,其基因序列如SEQ ID NO.1~NO.11所示;其使用方法包括采集样本并提取核酸的步骤;以提取的核酸为模板进行PCR反应的步骤;最后GeXP遗传分析仪毛细电泳分离样品的步骤,优点是特异性强、准确度高、通量高、可靠性强、成本低、无假阴性结果。