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利用锌指核酸酶敲除牛整合素β6亚基基因的方法
- 专利权人:
- 山东省农业科学院奶牛研究中心
- 发明人:
- 何洪彬,武建明,王洪梅,刘晓,刘文浩,方永志,仲跻峰
- 申请号:
- CN201210114541.8
- 公开号:
- CN102660577A
- 申请日:
- 2012.04.18
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2012
- 代理人:
- 杨琪
- 摘要:
- 本发明公开了一种利用锌指核酸酶(ZFNs)敲除牛整合素β6亚基基因的方法,其是根据牛整合素β6基因序列,设计可特异性识别该基因的锌指核酸酶ZFNs,构建表达载体并转染牛的细胞,如成纤维细胞,获得整合素β6亚基基因敲除的细胞。本发明利用ZFNs介导的基因敲除技术,设计合成了可特异性识别并切割整合素β6亚基基因的一对ZFNs,并成功获得整合素β6亚基双等位基因敲除的转基因克隆牛。利用一次转染,得到双等位基因敲除的细胞克隆,省去了药物筛选过程,促进了细胞单克隆的形成,提高了后续转基因胚胎的发育率。在转基因动物体内不含有外源基因,减少了对外源基因生物安全评价的环节。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/