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一种向半滑舌鳎垂体细胞添加维生素 E 后提高促性腺激素表达水平的方法
- 专利权人:
- 中国水产科学研究院黄海水产研究所
- 发明人:
- 王娜,王蔚芳,黄滨,史宝,王若青,马佳璐,陈松林
- 申请号:
- CN201610237755.2
- 公开号:
- CN105838663A
- 申请日:
- 2016.06.17
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 刘立春
- 摘要:
- 本发明涉及一种向半滑舌鳎垂体细胞添加维生素E后提高促性腺激素表达水平的方法,步骤如下:(1)半滑舌鳎垂体细胞的分离与培养:首先配制L‑15细胞培养基,然后用所配培养基进行原代细胞的培养:(2)向半滑舌鳎垂体细胞中添加维生素E:配制维生素E溶液,向步骤(1)中所培养的细胞中添加维生素E,在添加后第四天进行样品收集;(3)向半滑舌鳎垂体细胞中添加维生素E后FSH和LH的定量PCR分析;取步骤(2)中的细胞沉淀进行RNA的提取及反转录,然后进行实时荧光定量PCR反应;(4)向半滑舌鳎垂体细胞中添加维生素E后FSH和LH的ELISA分析;以步骤(2)中收集的上清液为材料依次进行标准品的稀释与加样、加样、温育、配液、洗涤、加酶、温育、洗涤、显色、终止、测定。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/