本发明涉及一种哺乳动物细胞表达的人激肽释放酶‑1,编码基因、表达方式、纯化工艺,以及重组蛋白检测方法和应用。激肽释放酶是一种丝氨酸蛋白酶,在人体组织中起着十分重要的生理作用。传统的组织提取方式常存在着免疫原性较高或来源困难、难以克服病毒污染等问题;而一般的哺乳动物细胞表达的人激肽释放酶‑1也存在着表达量低或者活性较低的缺陷。为此,本发明提供了如SEQ ID NO:1所示的重组hK1的编码基因,以及专为此设计的表达、纯化、重组蛋白检测方法及应用,与现有技术相比,本发明的重组hK1具有较高的表达量及活性,且本发明建立的纯化工艺和重组人激肽释放酶‑1药品检测方法为该药品开发过程中细胞株开发、工艺优化、临床前和临床研究以及工业化生产建立了基础。