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运用CRISPR‑Cas9系统敲除大麦VE合成通路中的关键基因HPT的方法
- 专利权人:
- 浙江大学
- 发明人:
- 边红武,曾章慧,刘翠翠,韩凝,朱睦元
- 申请号：
- CN201710194580.6
- 公开号：
- CN106906240A
- 申请日:
- 2017.03.29
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 周世骏
- 摘要：
- 本发明涉及大麦转基因材料的构建，旨在提供一种运用CRISPR‑Cas9系统敲除大麦VE合成通路中的关键基因HPT的方法。该方法包括下述步骤：gRNA靶位点的选择、gRNA片段的克隆、GG(gRNA‑gRNA)片段的连接、连接产物的PCR扩增、纯化产物和目标载体的酶切、纯化产物和目标载体的连接反应、连接产物转化大肠杆菌感受态、农杆菌介导的大麦转基因、阳性转基因植株的筛选、突变体测序。本发明利用先进的基因编辑技术‑CRISPR‑Cas9系统对大麦VE合成通路中的关键基因(HPT)进行靶向基因编辑，获得有效的功能缺失突变体，为大麦中生物活性物质的研究创造条件。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
