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实时荧光定量PCR方法鉴定转基因植物中T-DNA串联重复序列的拷贝数的方法
- 专利权人:
- 安徽农业大学
- 发明人:
- 魏书,席玉珍,刘晶晶,宋大鹏
- 申请号：
- CN201510128008.0
- 公开号：
- CN104745696A
- 申请日:
- 2015.03.23
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 胡敏
- 摘要：
- 本发明公开了一种实时荧光定量PCR方法鉴定转基因植物中T-DNA串联重复序列的拷贝数的方法，步骤包括：通过农杆菌介导的植物转化方法将含有筛选基因BAR的植物表达载体pSKI015连接上HMGA基因，转入到野生型Col-4拟南芥中；使用两个参考质粒连接载体；将经过草甘膦筛选的转基因拟南芥的RNA进行提取，反转录获得cDNA作为检测的模板，分别使用草甘膦抗性基因和HMGA基因的定量引物进行实用定量PCR的方式检测突变体植物的拷贝数。本发明的有益效果在于可以有效屏蔽T-DNA串联结构对识别转基因植物拷贝数的影响，而且定量PCR与Southern blot相比更加方便高效。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
