一种吡咯喹啉醌依赖型葡萄糖脱氢酶的热稳定性突变体及其高通量筛选方法
- 专利权人:
- 浙江德清汇宁生物科技有限公司
- 发明人:
- 徐志南,于怡,黄磊,朱建忠,杨叶东
- 申请号:
- CN201210054983.8
- 公开号:
- CN102559624A
- 申请日:
- 2012.03.05
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2012
- 代理人:
- 张欢勇
- 摘要:
- 本发明涉及一种定向改造可溶性吡咯喹啉醌依赖型葡萄糖脱氢酶(s-GDH)的分子结构,并采用高通量技术筛选热稳定性突变体的方法。其特征在于:通过易错PCR构建s-GDH的高容量突变文库,利用浸有有色底物的滤纸在菌落平板上进行原位筛选,并结合菌落直接转化法,获得s-GDH热稳定性提高的突变体。与野生型s-GDH相比,所述的s-GDH突变体的热稳定性获得了显著提高。得到高热稳定性的可溶性吡咯喹啉醌依赖型葡萄糖脱氢酶为进一步扩大葡萄糖脱氢酶的应用范围奠定了基础。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心