本发明提供了一种人源分子改造杀虫蛋白及其制备方法与应用,属于基因工程和生物防治领域。本发明提供了一种人源分子改造杀虫蛋白,所述杀虫蛋白CCL‑CCL_scFv的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。所述杀虫蛋白CCL‑CCl_scFv与小菜蛾(Plutella xylostella)中肠BBMV的亲和力显著高于Cry1Ab毒素,且与Cry1Ab和Cry1Ac毒素竞争结合小菜蛾中肠BBMV,为Cry1Ab和Cry1Ac毒素的模拟物;经小菜蛾室内杀虫生物活性测定,3d致死率可达55.35%,可有效的替代Cry1Ac毒素用于生物防治虫害。