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GmZFP3蛋白的制备与纯化
- 专利权人:
- 江苏省农业科学院
- 发明人:
- 张大勇,邵宏波,徐照龙,黄益洪,何晓兰,宁丽华
- 申请号：
- CN201610830242.2
- 公开号：
- CN106366170A
- 申请日:
- 2016.09.19
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 杨文晰`孙忠浩
- 摘要：
- 本发明提供一种GmZFP3蛋白的制备与纯化方法，首先克隆大豆GmZFP3基因，扩增GmZFP3基因的编码区，回收PCR产物，与pEasy‑T3 Vector克隆载体连接后酶切，并同时酶切pCZN1质粒，利用T4DNA连接酶连接，转化BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞，获得重组质粒pCZN1‑GmZFP3；接着利用重组质粒pCZN1‑GmZFP3转化大肠杆菌BL21(DE3)并培养含重组质粒pCZN1‑GmZFP3的表达菌株，优粗裂解液离心后收集上清液，加入洗脱缓冲液重悬浮，超声波破碎利用His标签纯化树脂纯化，即获得GmZFP3蛋白的制备与纯化产物；本发明获得的纯化GmZFP3蛋白通过western杂交进行验证，为后续的蛋白与核酸杂交实验奠定基础。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
