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一种单增李斯特菌与志贺氏菌的荧光定量PCR检测方法
- 专利权人:
- 中国计量学院;李素芳
- 发明人:
- 李素芳,徐 伟,刘 军
- 申请号：
- CN200810121427.1
- 公开号：
- CN101434992A
- 申请日:
- 2008.09.28
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2009
- 代理人:
- 陈继亮
- 摘要：
- 本发明涉及一种单增李斯特菌与志贺氏菌的荧光定量PCR检测方法，包括以下步骤：(1)PCR模板DNA提取：(1.1)待测样品DNA提取：取1ml待测样品进行DNA提取，1ml待测样品-12000rpm，2min，弃上清-沉淀用PBS洗两次-200μl TE重悬-加入8μl溶菌酶(10mg/ml)及2μl RNaseA(10mg/ml)，37℃水浴30min-按照UNIQ-10DNA提取试剂盒加入裂解液与蛋白酶K，55℃水浴30min-后参照UNIQ-10DNA提取试剂盒说明书提取DNA；(1.2)菌液DNA提取；(2)hly与ipaH质粒标准品的构建：(3)荧光定量PCR扩增及分析。本发明的有益效果：本发明运用双重荧光定量PCR(TaqMan探针)同步定量检测单增李斯特菌hly基因和志贺氏菌ipaH基因，为食品卫生行业提供一种特异、快速、定量准确的同步定量检测单增李斯特菌和志贺氏菌的方法。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
