A method of expressing a polynucleotide of interest in a subject's conical photoreceptor comprising subretinal delivery of a therapeutically effective amount of a recombinant AAV9-inducing vector
Intraocular injection of adeno-associated virus (AAV) vectors has been a clear route for the delivery of genetic drugs into the retina. Currently, vectors need to be injected into the subretinal space to provide gene transfer to the cone. In this approach, gene delivery is limited to cells that come into contact with the local “vesicles” of the injected fluid. Moreover, retinal detachment that occurs during subretinal injection is a concern in eyes with retinal degeneration. Here, the present inventor overcomes the limitations associated with AAV-mediated cone transduction in the fovea with supportive studies in mouse models, human induced pluripotent stem cell-organic organoids, post-human retinal explants and living macaques. To establish several new vector-promoter combinations. They provide efficient fovea cone transduction when the AAV9 variant is injected into the subretinal space a few millimeters from the fovea, without detachment of these vulnerable areas. The mode of delivery depends on the cone-specific promoter and produces high-level transgene expression that is compatible with photogenic vision recovery. Accordingly, the present invention provides a therapeutically effective amount of subretinal delivery of a recombinant AAV9-inducing vector comprising the VP1 capsid protein shown in SEQ ID NO: 11 and the polynucleotide of interest under the control of the pR1.7 promoter shown in SEQ ID NO: 12. It relates to a method of expressing a polynucleotide of interest in a conical photoreceptor of a subject comprising a.아데노-관련 바이러스(AAV) 벡터의 안구내 주사는 유전자 약물을 망막 내로 전달하기 위한 명백한 경로이었다. 현재, 벡터는 원추로 유전자 전달을 제공하기 위해 망막하 공간 내로 주사될 필요가 있다. 이러한 접근법에서, 유전자 전달은 주사된 유액의 국소 "소포"와 접촉하는 세포에 한정된다. 더욱이, 망막하 주사 동안 발생하는 망막 박리는 망막 변성이 있는 눈에서의 우려사항이다. 여기서, 본 발명자는 마우스 모델, 사람 유도된 다능성 줄기 세포-유기 기관모양, 사후 사람 망막 외부이식편 및 살아있는 마카퀴 내에서 뒷받침하는 연구와 함께 중심와 내의 AAV-매개된 원추 형질도입과 관련된 제한을 극복하기 위한 몇가지 새로운 벡터-프로모터 조합을 확립한다. 이들은 AAV9 변이체가 이러한 취약한 영역의 박리없이, 중심와로부터 수 밀리미터 떨어진 망막하 공간 내로 주사되는 경우 효율적인 중심와 원추 형
