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MARQUAGE N-TERMINAL EN UNE SEULE ÉTAPE DES PROTÉINES
专利权人:
THE TRUSTEES OF THE UNIVERSITY OF PENNSYLVANIA
发明人:
PETERSSON, E., James
申请号:
USUS2013/045542
公开号:
WO2013/188607A1
申请日:
2013.06.13
申请国别(地区):
US
年份:
2013
代理人:
摘要:
A selective method of modifying the N-terminus a protein using an aminoacyl tRNA transferase is provided. The method comprises reacting the protein with the aminoacyl adenosyl derivative, recognizable by AaT t-RNA transferase derived from E.Coli and similar bacterial systems. The method further includes production of protein fusion constructs by incorporation of an additional cysteine in the N -terminus and reacting this cysteine with a thioether placed on the C-terminus of a reaction partner protein, producing a fused construct. Selenocysteine can be included in the fused construct and further reduced producing alanine residue in the desired positions. An essential feature of the method is that the aminoacyl adenosine derivatives are pre-made and do not require a synthetase enzyme, allowing a great diversity of the N-terminus modifiers to be pre-made synthetically. The method is implemented as a kit.L'invention concerne un procédé sélectif de modification de l'extrémité N-terminale d'une protéine faisant appel à une aminoacyl-ARNt transférase. Le procédé consiste à faire réagir la protéine avec le dérivé d'aminoacyl adénosyle, reconnaissable par la transférase d'ARNt AaT dérivée d'E.Coli et de systèmes bactériens similaires. Le procédé comprend en outre la production de constructions de protéines hybride par incorporation d'une cystéine supplémentaire au niveau de l'extrémité N-terminale et réaction de ladite cystéine avec un thioéther placé sur l'extrémité N-terminale d'une protéine partenaire de réaction, ce qui produit une construction hybride. De la sélénocystéine peut être incluse dans la construction hybride et en outre réduite, ce qui permet de produite un résidu d'alanine au niveau des positions souhaitées. Une caractéristique essentielle du procédé réside dans le fait que les dérivés d'aminoacyl adénosine sont pré-produits et ne nécessitent pas d'enzyme synthétase, ce qui permet de pré-produire synthétiquement une grande diversité de modificateurs N-termin
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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