一种山羊TLR4基因敲除载体及其构建方法
- 专利权人:
- 安徽省农业科学院畜牧兽医研究所
- 发明人:
- 惠文巧,陈胜,汤继顺,班谦
- 申请号：
- CN201611222780.X
- 公开号：
- CN106755097A
- 申请日:
- 2016.12.27
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 董芙蓉
- 摘要：
- 本发明公开了一种山羊TLR4基因敲除载体及其构建方法，采用CRISPR/cas9系统，首先设计TLR4基因的sgRNA片段,合成sgRNA核苷酸序列，构建同时表达sgRNA和Cas9 D10A的质粒PYSY‑sgRNA，连接并转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞，最后对转化子进行验证；酶切和测序鉴定证明TLR4基因敲除载体构建正确。本发明采用CRISPR/Cas9构建的载体，为后续获得山羊TLR4基因缺失型肺泡上皮细胞系，研究支原体肺炎感染的免疫应答分子机制提供理论依据。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
