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一种制备原生质体的方法
- 专利权人:
- 中国科学院植物研究所
- 发明人:
- 林金星,王锋
- 申请号：
- CN200810226611.2
- 公开号：
- CN101402938B
- 申请日:
- 2008.11.17
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2010
- 代理人:
- 关畅`任凤华
- 摘要：
- 本发明公开了一种进行高效制备植物悬浮细胞原生质体的方法。该方法包括以下步骤：(1)用0.5-1M的甘露醇溶液处理植物细胞，然后收集细胞；(2)用酶解液酶解步骤(1)收集的细胞；(3)在经过步骤(2)处理的体系中加入A溶液，除去未酶解的细胞凝块后进行离心处理，收集沉淀，即得到原生质体；所述A溶液为水溶液，溶质为如下终浓度的物质：100-200mM NaCl，100-150mM CaCl2，2-10mM KCl，5-10mM葡萄糖，1-3mM脂肪酸甲酯磺酸钠；所述A溶液的pH为5.5-5.8。该方法主要适用于BY2悬浮细胞和拟南芥悬浮细胞原生质体的制备。用本发明的方法分离的悬浮细胞原生质体得率高，细胞生长状态好，结合PEG介导的瞬时转化可满足对目的基因进行细胞学定位，免疫共沉淀，Western杂交等多种研究目的。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
