The present invention relates to an anisotropic nanofiber structure for stimulus-responsive mechanical actuation, a preparation method thereof, and a use of the anisotropic nanofiber structure and, more specifically, to an anisotropic nanofiber structure for stimulus-responsive mechanical actuation, which allows physical or chemical compartmentalization through a hydro-electric injection method using stimulus-responsive polymer and stimulus-non-responsive polymers which are physically or chemically cross-linkable and each compartment is mechanically activated by external stimulus.본 발명은 자극반응성 기계적 동작 활성화를 위한 이방성 나노구조체, 이의 제조방법 및 상기 이방성 나노구조체의 용도에 관한 것으로, 보다 상세하게는 물리적 또는 화학적으로 가교결합이 가능한 자극반응성 고분자와 자극 비반응성 고분자를 이용해서 전기수력적 공동분사 방법으로 물리화학적으로 구획화되고, 외부 자극에 의한 각 구획들이 상이한 기계적 동작 활성화를 구현하는, 자극반응성 기계적 동작 활성화를 위한 이방성 나노섬유 구조체, 상기 이방성 나노섬유 구조체의 제조 방법, 및 상기 이방성 나노섬유 구조체를 이용한 약물 전달 및 조직 공학으로의 용도에 관한 것이다.