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一种生产核黄素的大肠杆菌菌株及构建方法及用途
- 专利权人:
- 天津大学
- 发明人:
- 陈涛,林振泉,徐志博,王智文,赵学明
- 申请号:
- CN201410057234.X
- 公开号:
- CN103865944A
- 申请日:
- 2014.02.20
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2014
- 代理人:
- 陆艺
- 摘要:
- 本发明公开了一种生产核黄素的大肠杆菌菌株及构建方法及用途,制备方法为:设计核糖体结合位点RBS1、RBS2、RBS3、RBS4和RBS5;将各个核糖体结合位点分别与基因ribA、ribB、ribD、ribE、ribC连接成片段,将各片段按顺序拼接并酶切连接到质粒pTrc99a得到质粒p20C-EC10;转入大肠杆菌,得到RF01S菌株;改造RF01S菌株的糖酵解途径及ED途径的相关基因,以提高核黄素的产量,并对核黄素的消耗途径进行改造,使核黄素代谢速度下降以进一步提高核黄素积累;将Ptrc强启动子插入到菌株的基因组中,得到生产核黄素的大肠杆菌菌株。本发明所构建的大肠杆菌菌株遗传背景清楚,可利用葡萄糖为底物生产核黄素,且在摇瓶发酵结果为1g/L以上,为提高核黄素产量和产率奠定了基础。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/