The present invention relates to a nucleotide sequence as shown in SEQ ID NO: 1 for encoding a Marburg virus envelope glycoprotein, and to a human replication-deficient recombinant adenovirus capable of expressing the nucleotide sequence and a preparation method therefor, as well as an application thereof in the preparation of a vaccine against Marburg virus disease. The vaccine uses an E1 and E3 deleted replication-deficient human type-5 adenovirus as a vector, and HEK293 cells integrating an adenovirus E1 gene as a packaging cell line, and a protective antigen gene carried is a codon-optimized Marburg virus Angola strain envelope glycoprotein gene. After codon optimization of the envelope glycoprotein gene, significant expression of envelope glycoprotein can be detected in transfected cells.La présente invention concerne une séquence nucléotidique telle que représentée dans SEQ ID NO : 1 pour coder une glycoprotéine d'enveloppe du virus de Marburg, et un adénovirus recombinant humain déficient du point de vue de la réplication capable d'exprimer la séquence nucléotidique et son procédé de préparation, ainsi qu'une application associée dans la préparation d'un vaccin contre une maladie du virus de Marburg. Le vaccin utilise un adénovirus de type 5 humain déficient du point de vue de la réplication à E1 et E3 délétés en tant que vecteur, et des cellules HEK293 intégrant un gène E1 d'adénovirus en tant que lignée cellulaire d'encapsidation, et un gène d'antigène de protection porté est un gène de glycoprotéine d'enveloppe de souche angolaise de virus de Marburg à codon optimisé. Après l'optimisation des codons du gène de glycoprotéine d'enveloppe, l'expression significative de la glycoprotéine d'enveloppe peut être détectée dans les cellules transfectées.