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一种大鼠Rap1b基因重组腺病毒、质粒、构建方法及应用
- 专利权人:
- 黑龙江八一农垦大学
- 发明人:
- 郭景茹,计红,马莉,刘艳芝,连帅,郭丽,杨焕民,甄丽,孔凡志
- 申请号:
- CN201710278396.X
- 公开号:
- CN106987602A
- 申请日:
- 2017.04.25
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明公开了一种大鼠Rap1b基因重组腺病毒质粒,大鼠Rap1b基因重组腺病毒质粒是先将如SEQ ID NO.1所示的Rap1b CDS区全长基因序列插入到pMD18‑T载体中,得到重组克隆质粒pMD‑Rap1b;然后将重组克隆质粒pMD‑Rap1b用BamHI和EcoR I双酶切后,回收的目的基因片段插入到pShuttle‑CMV‑EGFP重组穿梭载体中得到重组穿梭质粒pShuttle‑GFP‑Rat Rap1b;最后将重组穿梭质粒pShuttle‑GFP‑Rat Rap1b用I‑CeuI和I‑SceI双酶切后,回收的长序列片段的Rap1b基因片段插入pAdxsi重组腺病毒骨架载体中后得到的。另外,本发明还公开了该质粒的构建方法和制备的重组腺病毒。本发明构建的大鼠Rap1b基因重组腺病毒质粒在大鼠肝脏细胞中的过表达,过表达之后,有助于探析Rap1b的功能,可以抵御应激刺激,大鼠Rap1b基因重组腺病毒滴度高,不致癌。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/