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菜豆荚斑驳病毒ELISA-巢式RT-PCR检测试剂盒及其检测方法
- 专利权人:
- 福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心
- 发明人:
- 沈建国,廖富荣,蔡伟,高芳銮
- 申请号：
- CN201610550115.7
- 公开号：
- CN106011312A
- 申请日:
- 2016.07.13
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 戴雨君
- 摘要：
- 本发明涉及一种菜豆荚斑驳病毒ELISA‑巢式RT‑PCR检测试剂盒及其检测方法。所述试剂盒包括：PBST缓冲液、包被缓冲液、BPMV抗体、酶标抗体缓冲液、BPMV酶标抗体、pNPP、外侧正向引物、反向引物、内侧正向引物、RT Buffer、RNA酶抑制因子、反转录酶、dNTPs、Taq PCR Mix、阳性对照、阴性对照和RNase‑free ddH2O。本发明将ELISA和巢式RT‑PCR相结合，首先对样品提取液进行ELISA检测，再在酶标板孔中直接反转录合成cDNA，利用cDNA为模板进行第一轮PCR，然后再以第一轮PCR产物为模板进行第二轮PCR，扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，如果出现大小为296 bp的特异性目的片段，则判定检测的病毒为菜豆荚斑驳病毒。本发明特异性强、准确性好、灵敏度高、操作简便，适用于进出境及农业生产上菜豆荚斑驳病毒的快速检测鉴定。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
