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一种克隆草地早熟禾谷氨酰胺合成酶PpGS1基因的方法
- 专利权人:
- 东北农业大学
- 发明人:
- 陈雅君,包文龙,谢福春,张璐,杜亚琳,崔国文
- 申请号：
- CN201711379297.7
- 公开号：
- CN107904235A
- 申请日:
- 2017.12.20
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明属于生物技术育种领域，公开了一种克隆草地早熟禾谷氨酰胺合成酶基因PpG基因的方法,方法包括：(1)通过电子克隆获得PpGS1基因的部分cDNA序列，长度为1065bp。(2)以cDNA序列为靶标序列，设计特异引物，通过RT‑PCR技术进行扩增。(3)通过琼脂糖凝胶电泳，回收PCR产物。并将回收的特异产物连接到pEasy cloning vector载体上，转化感受态细胞，对阳性克隆进行测序，得到草地早熟禾PpGS1基因的部分cDNA序列，与电子克隆长度一致。(4)根据克隆得到的部分cDNA序列，设计特异引物，利用Clontech公司的SMARTTM RACE技术原理进行cDNA末端扩增，所获得的PpGS1cDNA全长为1451bp。(5)实时荧光定量PCR技术检测表明PpGS1基因具有组织特异表达性。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
