本发明公开了一种青蟹双顺反子病毒-1检测用引物组和Taqman探针,引物组由上游引物和下游引物组成,所述的上游引物的碱基序列如序列表中SEQ ID NO.1所示,所述的下游引物的碱基序列如序列表中SEQ ID NO.2所示,所述的Taqman探针的碱基序列如序列表中SEQ ID NO.3所示,在所述的Taqman探针的5′端标记有FAM为荧光发射基团,3′端标记有TAMRA荧光淬灭基团,所述的Taqman探针位于所述上游引物和下游引物之间。还公开了采用该引物组和探针的检测青蟹双顺反子病毒-1的方法和试剂盒,该方法成本低、耗时短、产率高,特异性高,且阴阳性结果差异显著,验证率高,更加明显可靠。