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一种重组变构胶原酶的制备方法及其应用
- 专利权人:
- 杭州观苏生物技术有限公司
- 发明人:
- 仓勇,张震,杜刚,陈福鼎
- 申请号:
- CN201810851432.1
- 公开号:
- CN108949730B
- 申请日:
- 2018.30.07
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2020
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明涉及重组变构胶原酶的纯化方法及其应用,公开了一种制备高纯度单一突变体胶原蛋白酶ColH的方法和所获得的产品。所述制备高纯度单一突变体胶原蛋白酶ColH的方法包括采用特定宿主菌BL21(DE3)表达E451D单点突变ColH变构胶原酶蛋白,经低温菌种发酵诱导后,提高目的蛋白产量。通过五步纯化:Capto Phenyl HS疏水层析;Capto Q阴离子交换层析;CaptoOctyl疏水层析;Phenyl HP疏水层析;Source 15Q阴离子交换层析后,获得了纯度98%以上的目的蛋白。生物学实验结果表明,此工艺生产的突变胶原蛋白酶纯度高,稳定性好,与之前的胶原蛋白酶商品相比具有明显的优势,酶比活显著提高。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/