CULLEN, Bryan, R.,KENNEDY, E., Matthew,BOGERD, Hal, P.,SCHINAZI, Raymond, F.,KORNEPATI, Anand,MEFFERD, Adam
申请号：
USUS2015/016354
公开号：
WO2015/126927A2
申请日:
2015.02.18
申请国别(地区):
US
年份:
2015
代理人:
摘要：
Provided herein are recombinant constructs, vectors and expression cassettes including a first promoter which is suitably a tRNA promoter operably connected to a first polynucleotide encoding a first single guide RNA and a second promoter operably connected to a second polynucleotide encoding a Cas9 polypeptide. The first single guide RNA includes a first portion complementary to a strand of a target sequence of a DNA virus and a second portion capable of interacting with the Cas9 polypeptide. Also provided are codon optimized Staphylococcus aureus derived Cas9 polynucleotides and polypeptides with nuclear localization signals and optionally an epitope tag. Also provided are constructs for production of sgRNAs including a tRNA. Methods of inhibiting viral replication, inhibiting expression of a target sequence from a virus or treating a viral infection or viral induced cancer using the compositions are also provided.L'invention concerne des produits de recombinaison, des vecteurs et des cassettes d'expression comprenant un premier promoteur qui est de manière appropriée un promoteur de l'ARNt fonctionnellement relié à un premier polynucléotide codant pour un premier ARN guide simple et un second promoteur fonctionnellement relié à un second polynucléotide codant pour un polypeptide Cas9. Le premier ARN guide simple comprend une première partie complémentaire à un brin d'une séquence cible d'un virus d'ADN et une seconde partie capable d'interagir avec le polypeptide Cas9. L'invention concerne également des polynucléotides et des polypeptides Cas9 dérivés de Staphylococcus aureus optimisés de codon comprenant des signaux de localisation nucléaire et facultativement un marqueur d'épitope. L'invention concerne également des produits destinées à la production d'ARNgs comprenant un ARNt. L'invention concerne également des procédés d'inhibition de la réplication virale, d'inhibition de l'expression d'une séquence cible d'un virus ou de traitement d'une infection virale ou
